序
不废话了，这个方法多少有点坑，效率远远小于有超净工作台的效率
组培我本来打算明年技术更成熟一点后再发的来着（因为贴吧还有大佬研究组培，于是我就抢发了
无超净工作台的组织培养20年我就有构想了，期间进行了无数次实验，也感谢星星的陪伴，没有星星，这个技术也出不来
@幸运大宝星

等我一会，吃个午饭先

紫外线杀菌可以就地取材

使用的器材（含药品）
1，普通蒸锅一个
2，高压汞灯（不产臭氧）
3，二分之一SM培养基粉末（无蔗糖，无琼脂，不要自己配，配不出来的，有现成的商品）
4，实验用琼脂粉
5，特级纯蔗糖
6，一个人类
7，精确pH试纸（不能用广泛的）
8，组织培养瓶（有现成商品，要盖子也透明的）
9，若干个烧杯，锥形瓶，培养皿
10，酒精灯
11，陶土网（石棉网致癌，误用）
12，燃料酒精
13，生石灰（分析纯）
14，纯碱（分析纯）
15，草酸（分析纯）
16，氯化钙（分析纯）
17，漏斗（玻璃或塑料）
18，滤纸若干
19，细胞分裂类植物生长调节剂
20，生长素类植物生长调节剂

D d

前期准备
1配置用来调酸碱性的溶液（别跟我说强酸不能制弱酸，这是高中的说法）
取等物质的量的草酸与氯化钙，加水，充分反应，过滤，所得到的溶液稀释至pH=2
这就是用来调酸的溶液
取等物质的量的生石灰与纯碱，加水，充分反应，过滤，稀释pH=12
这就是用来调碱的溶液

上述制取的用来调酸的溶液可以用来溶解6—BA
用来调碱的溶液可以用来溶解NAA

2配置1/2MS培养基
按照1/2MS培养基瓶子上面写的添加量（1L加xxg），向锥形瓶中，加入1/2SM培养基粉末，加入30g蔗糖，加入5~7g琼脂糖，加入700ml水，放置于陶土网上，用酒精灯加热，完全溶解后，加入植物激素（具体浓度从网上查阅相关论文，培养种子时可以不加激素），定容至1L，调pH值到5.6~5,8（仅供参考，具体pH值看论文）
等培养基冷却至不烫手后，倒入培养瓶中（这里与正规组培不同，先倒平板后灭菌），盖上培养瓶盖子，用蒸锅进行常压蒸汽灭菌（30~60min），灭菌后，等培养基冷却后备用

3
准备一个房间，里面不能有食虫，人类，需要较为干净
房间用84消毒液进行地面，桌面消毒，后打开高压汞灯，消毒30min（注意，不能直视高压汞灯，需要用遥控开关再活物离开后打开）

4，对器械（镊子，培养皿等）进行长时间煮沸消毒

5对手部进行酒精擦拭消毒，带好口罩

接种工作

取外植体（必须由无菌植株提供，从家里养的食虫上面直接取还是算了吧家里食虫内部寄生的杂菌太多了，几乎100%染菌，无菌植株可以通过种子培养得到，种子好消毒，且内部几乎无菌），先用酒精消毒5s（种子可以套一个无菌纱布浸泡），无菌水冲洗（可以用纯净水进行灭菌得到）然后用3%过氧化氢浸泡15min消毒

食虫植物种子的另外消毒方法（来自Flytrapstore ，Flytrapstore）
浸入91％乙醇中后快速取出。
浸泡3％过氧化氢2~3分钟。
浸泡10％漂白剂，茅膏菜和土瓶草 6分钟，捕蝇草10分钟，瓶子草12分钟。注：茅膏菜属种类繁多，物种之间种子有较大的不同