有没有大佬有肿瘤干细胞成球实验的protocol呀，求

BECB往届会议吸引了超过200位参会者，涉及40多个国家和地区，分别是中国、新加坡、日本、韩国、英国、美国、乌克兰、加拿大、芬兰、意大利、法国、比利时、葡萄牙、德国、西班牙、埃及、泰国、越南、以色列、塞尔维亚、巴西、马来西亚、俄罗斯、捷克共和国、波兰、罗马尼亚、保加利亚、印度尼西亚、阿根廷、伊拉克、白俄罗斯、危地马拉、阿曼、菲律宾、约旦、尼日利亚、墨西哥、希腊、沙特阿拉伯、秘鲁等。 2024 3rd International Symposium on Bi

生物安全柜操作规范及维护保养 生物安全柜是能防止实验操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱型空气净化负压安全装置。是实验室生物安全中一级防护屏障中最基本的安全防护设备。 为规范生物安全柜的操作，本文从人员、使用环境、设备操作流程及注意事项等几个方面进行阐述，使操作人员能够正确使用生物安全柜。 使用人员与环境 1、首先，微生物检测人员需进行生物安全柜的使用培训才能进行操作，未经正规

生物安全柜操作规范及维护保养 生物安全柜是能防止实验操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱型空气净化负压安全装置。是实验室生物安全中一级防护屏障中最基本的安全防护设备。 为规范生物安全柜的操作，本文从人员、使用环境、设备操作流程及注意事项等几个方面进行阐述，使操作人员能够正确使用生物安全柜。 使用人员与环境 1、首先，微生物检测人员需进行生物安全柜的使用培训才能进行操作，未经正规

流动相是影响液相色谱的关键因素。一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，但是如何配制。选择配制的方法不同，分析结果特别是保留时间，是会有显著差别的。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，水性溶剂也常用于缓冲液。常因资料上表示的内容和实际的配制方法不同，而产生流动

免疫荧光染色是实验室常用的技术之一，但在操作过程中，有许多需要注意的细节，任何一个环节的失误都可能导致实验失败。本文将为您介绍免疫荧光染色的注意事项，并附上零失误封片技巧。 1. 抗体选择：选择针对您研究的目标蛋白特异性高、亲和力强的抗体，一抗的浓度需要预实验摸索。一抗浓度过高(本身荧光实验，一抗的浓度就较高)，也是造成自发荧光强的重要原因。 2. 抗体稀释：根据抗体说明书建议，使用合适的稀释液和稀释比例进行

免疫荧光染色是实验室常用的技术之一，但在操作过程中，有许多需要注意的细节，任何一个环节的失误都可能导致实验失败。本文将为您介绍免疫荧光染色的注意事项，并附上零失误封片技巧。 1. 抗体选择：选择针对您研究的目标蛋白特异性高、亲和力强的抗体，一抗的浓度需要预实验摸索。一抗浓度过高(本身荧光实验，一抗的浓度就较高)，也是造成自发荧光强的重要原因。 2. 抗体稀释：根据抗体说明书建议，使用合适的稀释液和稀释比例进行

分子克隆实验——无缝克隆 今天和大家讲讲无缝克隆常见的问题以及解决方法。 1.平板上很少或者没有克隆菌落 建议使用试剂盒附带的阳性对照，可排除试剂盒本身的影响。进一步判定，主要有以下可能的情况和建议： 01载体制备 线性化载体和插入片段的纯度不够，抑制反应。 02插入片段制备 1、引物设计不正确：同源臂15~25nt（不计算酶切位点）,CG含量40~60%。 2、线性化载体和插入片段的纯度不够，抑制反应。若线性化载体与插入片段已经过纯化，

菌种保藏是指保持微生物菌株的活力和遗传性状的技术。微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡，因而常常造成菌种的衰退。菌种保藏的目的就是使菌株存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异，保持菌种原有的活性和各种特征。菌种保藏的基本原理是使微生物的生命活动处于半永jiu性的休眠状态，也就是将微生物的新陈代谢作用限制在最低范围内。 实验室常用的保菌方法有：甘油保菌法、斜面保菌法、穿刺保菌法、液体

未来可期 www.huanova.com 市场推广主管（专员） 简历投递：hr@huanova.com 职位职责： 1、推进相关产品的市场调研及分析、市场策略的制定及执行相关工作； 2、制定年度公司产品的学术推广计划，并落实相关工作； 3、建立产品合理、科学的市场定位，并不断探索新的发展方向； 4、搜集并分析竞争产品的信息及策略，提出相应的应对政策和应对方法； 5、建立和维护相关专家网络，定期拜访； 6、 制定合理、可行的市场拓展计划，并协调实施，解决市场

近年来，斑马鱼作为新型模式动物已广泛应用于发育生物学、遗传学和行为学等领域。它在神经系统功能和形态发育方面被认为是优秀的模型，尤其在研究神经退行性疾病方面表现突出。由于斑马鱼基因同人类基因相似，其简单而能支配复杂活动的神经系统成为研究运动、学习和记忆等行为学评价的理想选择。 T迷宫行为范式程序 斑马鱼T迷宫由两块透明的丙烯酸玻璃板拼接而成，由长臂和断臂两个部分组成。其中长臂长、宽和高分别是40cm、10cm和10cm

1 总述实时荧光定量PCR（后续简称为qPCR）顾名思义就是在PCR反应体系中加入荧光物质，通过荧光信号的实时接收监测PCR反应进程，由于其模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，以此为依据进而达到定量的目的。 简单来讲，qPCR可分为荧光染料法（以SYBR GreenⅠ最常用）与荧光探针法（TaqMan 探针）两种，而其结果分析方法也有绝对定量和相对定量之分。在此不一一赘述，此次分享以SYBR GreenⅠ法为例，结果分析选用相对定量法。 2 实验设计2.1 总

活性氧（ROS）的流式检测通常是通过使用荧光探针如DCFH-DA来监测细胞内活性氧水平的变化。以下是该检测方法的一些关键步骤和原理： 01选择荧光探针常用的荧光染料是DCFH-DA，它能够进入细胞并在细胞内被酯酶水解成DCFH。DCFH随后可以被细胞内的活性氧氧化，生成发荧光的DCF。 02DCFH-DA是一种用于检测活性氧ROS的荧光探针，全称为2,7-二氯荧光素二乙酸酯。其工作原理为：DCFH-DA本身没有荧光，但可以自由穿过细胞膜，一旦进入细胞，它会被细胞内的酯

实验技能分享免疫荧光 免疫荧光（Immunofluorescence，IF）是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一种强大的技术。它的原理是利用荧光标记的抗体作为探针对组织或细胞内的特定抗原进行定位和定性的分析。IF是一个很好的检测技术工具，用于研究感兴趣的产物如分子、蛋白质或糖蛋白的表达、定位、分布和迁移。 免疫荧光检测方法 直接免疫荧光：携带荧光素的抗体直接与抗原反应，形成抗原—荧光素标记抗体复合物。该法优点是较

急性肺损伤( ALI) 是由于肺内外致病因素造成弥漫性炎性肺泡浸润、出血、肺水肿和透明膜形成，患者血氧结合能力降低为主的危急症候，严重者发展为急性呼吸窘迫综合征 。 在过去的二十年里，已经开发了几种治疗策略，并取得了显著的进展；然而，死亡率仍然很高，超过三分之一的患者死亡，一些幸存者由于长期低氧而出现脑损伤等并发症。目前 ALI 的病死率仍相当高，为 29%~42%，且与致病因素有很大关系；败血症的病死率约为43%，肺炎和误吸的

qPCR从样本采集到结果检出有很多的步骤，包括样本采集、样本保存、样本处理、样本检测、数据分析等一系列环节，不同的环节可以选择不同的对照进行监测，对照总体可分为阴性对照与阳性对照两类： 阴性对照 实验中经常遇到无法判断反应孔中的扩增信号是样本真实扩增还是污染扩增的情况，这就需要阴性对照来作为对比。常见的阴性对照有以下几种： ● 无模板阴性对照(No Template Control, NTC) NTC一般用纯化水代替，用以替代正常反应中的核酸样本

1细胞 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异。 2.药物浓度的设定。一定要多看文

保持实验鼠的健康，对于实验结果的稳定性和可重复性至关重要。但在实际操作中，实验鼠由于各种原因导致感染的情况屡见不鲜。被细菌，病毒和体内外寄生虫感染的小鼠，不仅自身健康受到威胁，甚至还有可能传播给其他品系的小鼠，因此小鼠的净化非常关键和必要。 那小鼠的生物净化方式有哪些、应该如何选择？ 什么时候需要净化? 遇到以下情况建议净化： 1.动物实验结果不稳定，重复性差，实验鼠已经确认受到病原体污染;2.怀疑受到感染，

免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术 (immunocytochemistry) 是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。它是组织化学的分支，它是用标记的特异性抗体 (或抗原) 对组织内抗原 (或抗体) 的分布进行组织和细胞原位检测技术。 一、免疫组化技术的基本原理 应用免疫学及组织

什么是细胞转染？ 细胞转染（Transfection）是指将外源性基因（如 DNA、RNA、蛋白质等）导入到细胞内的技术。转染的目的是产生重组蛋白，或特异性增强或抑制转染细胞中的基因表达。随着基因和蛋白功能的深入研究，转染已经成为科研实验中最常用的技术手段之一。研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。 细胞转染的分类 根据导入的核酸存在于宿主细胞的时间长短，可以分为瞬时转染和稳定转染

细胞裂解液的目的： （1）利用去垢剂破坏脂质双分子层，破裂细胞； （2）溶解蛋白； （3）蛋白变性使其稳定； （4）抑制蛋白酶活性。 常见的细胞裂解液成分： 50mM Tris-HCl pH7.4 （缓冲体系） 150mM NaCl （等渗体系） 1mM PMSF （蛋白酶抑制剂） 1mM EDTA （变性剂和稳定剂） 5μg/ml Aprotinin （蛋白酶抑制剂） 5μg/ml Leupeptin （蛋白酶抑制剂） 1% Triton X-100 （弱变性剂） 1% Sodium deoxycholate （中度变性剂和溶解剂） 0.1% SDS （强变性剂和溶解剂） 细胞裂解液的一般

提到标准品和对照品，也许还有很多小伙伴并没有真正了解两者的含义和区别，更不能在工作中将两者良好的运用，今天小析姐就汇总了我们工作常见的但是又存在误区的词，这就一定不能漏掉标准品和对照品了，快来看看吧。 1、标准品 对照品与标准品是2个不同的概念，中国药典凡例中已有明确的定义： 对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质，而标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准

企业概况 恩次方全民防癌中心是一家国家级生物医学高科技企业，专注于细胞再生医学技术研发、生命健康管理以及癌症预防应用。在大健康产业的“产、学、研、教”领域布局，是科学研究和技术服务业的领军企业。 业务领域 恩次方全民防癌中心通过四位一体的布局，首创“细胞＋基因”和精准生命系统管理服务体系，业务涵盖干细胞靶向治疗研究成果、癌症预防、细胞储存等多个领域。 创新科技 以科技为引领，恩次方全民防癌中心在细胞再生

Western blot的洗液TBST是实验室常用的配制液体，对于TBST的配方也基本上相差不多，其中配方中就有一种组分是Tween-20，一种黄色或琥珀色澄明的油状液体，具有特殊的臭气和微弱苦味。用移液枪吸取时会有一种滞后感。为什么在Western blot的洗液TBST中要加入这么一种试剂，Tween-20在Western blot 中在发挥什么样的作用呢？ 1、Tween-20 首先了解一下什么是Tween-20。Tween-20也写作Tween 20，也称Polyethylene glycol sorbitan monolaurate，中文名为吐温-20或吐温20。Tween-20为黄色或

1 总述实时荧光定量PCR（后续简称为qPCR）顾名思义就是在PCR反应体系中加入荧光物质，通过荧光信号的实时接收监测PCR反应进程，由于其模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，以此为依据进而达到定量的目的。 简单来讲，qPCR可分为荧光染料法（以SYBR GreenⅠ最常用）与荧光探针法（TaqMan 探针）两种，而其结果分析方法也有绝对定量和相对定量之分。在此不一一赘述，此次分享以SYBR GreenⅠ法为例，结果分析选用相对定量法。 2 实验设计2.1 总

细胞迁移(Cell migration)：因其类似体外伤口愈合过程，又名伤口愈合实验(Wound healing assay)，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。可用于可以观察药物、基因等外源因素对细胞迁移、修复和相互作用的影响。 基本原理：在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕/伤口”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕/伤口”愈合，于细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像，通过测量不同时间点的划痕间距并

免疫组织化学技术：检测组织原位表达的肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等抗原性物质。 免疫 immuno- 抗原抗体的免疫反应 组织 histo- 检测组织中表达的抗原性分子 化学 chemistry 酶促/荧光可见反应 （一）组织和细胞标本的准备 1.组织标本的取材 —— 取材新鲜，固定及时，形态完好。 2. 细胞标本的准备 （1）活体细胞标本： 印片法、穿刺吸取法、沉淀法 （2）培养细胞标本： ① 细胞涂片: 将细胞制成悬液（10^6）涂在 涂有切片粘合

分子克隆（基因克隆/DNA重组/载体构建）技术是一种在分子水平上操作的技术，用于将特定的DNA片段从供体生物中分离出来，然后通过体外重组、转化和转导等方法，将其插入到适合的克隆载体中，并将重组克隆载体引入到合适的寄主体内进行复制与扩增。可以应用于蛋白表达、病毒包装、基因治疗、细胞治疗、mRNA疫苗、RNA干扰、细胞功能等研究。 具体操作流程：一、聚合酶链式反应（PCR）DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，

细胞迁移(Cell migration)：因其类似体外伤口愈合过程，又名伤口愈合实验(Wound healing assay)，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。可用于可以观察药物、基因等外源因素对细胞迁移、修复和相互作用的影响。 基本原理：在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕/伤口”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕/伤口”愈合，于细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像，通过测量不同时间点的划痕间距并

细胞培养用的培养基是不是必须加双抗？血清在使用之前是不是一定要灭活？往培养基里加细胞因子又是什么操作？ 关于这三个问题，今天在这里分享一下我的看法。 要不要加双抗？ 在培养基中添加抗生素是一种常见的操作，其主要作用是抑制或杀死培养物中的某些细菌或真菌，从而避免它们对目标细胞的干扰和污染。 在培养实验中，选择适当浓度和种类的抗生素，可以有效地消除或减少杂菌、污染菌或其他不需要的微生物，保证培养物的纯度和

1.关于转膜 问题描述： 1）明明赶气泡了，可显影发现还是有气泡？ 2）条带为何不处于同一水平线，总是倾斜向上或向下？ 3）辛辛苦苦转膜半天发现蛋白没转上去？ 4）如何判断蛋白转膜没转到位或者转过了？ 问题分析及解决方案： 1）气泡的产生并不只是在制作“三明治”的时候小心就可以避免的，在放置PVDF膜或NC膜时赶气泡确实是不可缺少的一步，除此之外还要注意在放置滤纸、海绵时也要格外小心，稍有不慎，轻微的位置挪动都有可能导致气

高血压病是世界公认的心血管疾病的主要危险因素。所有心脑血管病相关死亡，约半数由高血压所致。临床上常用的抗高血压药，在降压及改善症状方面尚存在许多不足。现代医学对高血压的确切病因及发病机制尚存在许多未知，加强对高血压病因及发病机制的研究，开发出更有效的治疗药物是非常必要的。而实验研究离不开高血压动物模型，好的动物模型能够较好地模拟疾病状态，为全方位的研究提供可能。 动物的选择 常见的动物模型类别有鼠、

引物是一种短的DNA或RNA序列，用于在PCR（聚合酶链式反应）和其他分子生物学技术中扩增和检测特定的DNA或RNA序列。 引物通过与目标序列的互补碱基配对来定向扩增所需的DNA或RNA片段。在分子生物学研究中，引物的设计是非常重要的一步，因为它直接影响到PCR扩增的特异性和灵敏度。 一、普通PCR与荧光定量PCR引物设计上的相同注意点 1.序列的查找是一致的，在NCBI上搜索不同物种的同一基因，序列选取应在基因的保守区段，选择合适片段长度 2.引物长

目前，有一种免疫治疗药物细胞程序性死亡-配体1(PD-L1）抑制剂，被广泛用于刺激免疫系统，以对抗癌症。但许多患者对其无反应，或对其产生耐药性。一种旨在改善患者对免疫治疗反应的新型小分子候选药物正处于早期临床试验阶段。 近期，科学家在《自然》杂志上发表的一项研究表明，这种小分子可通过两种不同的机制的机制来使肿瘤的生长速度受到抑制，进而可提高实验动物的生存率。研究人员报告说，这种分子可增强肿瘤对免疫攻击的敏感性

为什么忙，因为要做实验呀，做细胞实验、蛋白实验、病理实验、分子实验、动物实验、快速检测等，

生物医学方向 有做动物实验的童鞋可以交流