本发明提供古罗糖醛酸寡糖的新应用,为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确,以下对本发明进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
褐藻胶来源于海带等海洋植物,来源广泛、丰富,对其进行酶解可获得古罗糖醛酸寡糖(GOS)。研究发现,GOS 具有很多的生物活性和作用,包括诱导巨噬细胞分泌 TNF-α 等细胞因子、促进植物及微藻的生长、及抗肿瘤活性等。但对于 GOS 作为 NO 增强剂的作用仍未有发现。目前市场上对 NO 增强剂等这类保健品的开发主要具有改善性功能,增强肌肉力量,防止心血管疾病等作用。经过研究发现,GOS 能诱导巨噬细胞生成 NO,可将古罗糖醛酸寡糖作为一氧化氮生成促进剂 ;而 NO 具有血压调控,预防中风和心脏病,促进免疫调节,降低胆固醇,改善糖尿病症状,以及作为胃肠道动力强抑制剂神经递质,扩张血管,保护胃黏膜等的作用,因此 GOS 可作为一种激活巨噬细胞参与免疫反应的激活剂,本发明中的发现是具有创新性和重要意义的。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
实施例 1 :GOS 促进 RAW264.7 细胞生成 NO
将由褐藻胶分离获得的均聚古罗糖醛酸(PG)经褐藻胶裂解酶降解后获得 GOS。RAW264.7 细胞(2×105 个 / 孔)贴壁于 96 孔板中,4-6h 后,弃上清,加入 1mg/ml GOS 和 1mg/ml PG,以无血清RPMI1640培养基为阴性对照组(Ctrl),1μg/ml脂多糖(LPS)为阳性对照,刺激 24h 后,应用 Griess 检测培养基中的 NO 生成量,其结果如图 1A 所示。在时间梯度实验中,GOS 分别刺激 RAW264.7 细胞 6,12,24,36h 后,应用 Griess 检测培养基中的 NO 生成量,其结果如图 1B 所示。在浓度梯度实验中,GOS(0.1mg/ml,0.5mg/ml,1.0mg/ml)刺激RAW264.7 细胞 24h 后,按 Griess 检测培养基中的 NO 生成量,其结果如图 1C 所示。
结果表明,与 Ctrl 组相比,GOS 能促进 RAW264.7 细胞生成 NO,并且具有显著差异性(图 1A)。在时间梯度的实验中发现,GOS 的刺激时间为 24h 时,RAW264.7 细胞生成较多的 NO(图 1B)。在浓度梯度实验中发现,GOS 促进 RAW264.7 细胞生成 NO 的量随着 GOS 浓度的增加而增加,呈浓度依赖性(图 1C)